羅氏潮霉素B目前常用于篩選和維持培養(yǎng)含潮霉素抗性基因的原核或真核細(xì)胞。
抗性基因:
對(duì)潮霉素B的抗性源自編碼潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶(Hph)的基因。至今發(fā)現(xiàn)兩種來(lái)源:
Streptomyceshygroscopicus產(chǎn)生的Hph抗性基因
Escherichiacoli,Klebsiellapneumoniae內(nèi)質(zhì)粒攜帶的Hph抗性基因(常用)
羅氏潮霉素B生物應(yīng)用:
1)篩選和維持培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Hph載體的原核細(xì)胞或真核細(xì)胞(植物細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞)
2)由于作用模式的差異,常與G418(GeneticinTM),Zeocin?和blasticidin S聯(lián)合使用,篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩個(gè)不同載體的細(xì)胞株
3)抗病毒劑,由于潮霉素B選擇性滲透進(jìn)入因病毒感染增強(qiáng)通透性的細(xì)胞,而且具有抑制翻譯的功效
4)作為驅(qū)蟲(chóng)藥加入動(dòng)物飼料
雙抗性穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選的抗生素作用機(jī)制及抗性
抗生素抗性機(jī)制抗性基因哺乳動(dòng)物篩選濃度
潮霉素B干擾70S核糖體易位和誘導(dǎo)對(duì)mRNA模板的錯(cuò)讀Hph200~500μg/mL
G418干擾80S核糖體功能和抑制蛋白合成Tn5/Tn601100~1000μg/mL
Zeocin摻入或者切割DNA引起細(xì)胞死亡Shble50~100μg/mL
blasticidinS核糖體上抑制肽鍵形成Bsd/BSD3~50μg/mL
羅氏潮霉素B產(chǎn)品來(lái)源:http://www.wissen-bio.com/wbscell-SonList-1098137/
http://www.chem17.com/st251749/
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