GPC色譜柱的清洗過(guò)程跟重生過(guò)程不一樣,如果僅僅是洗前次進(jìn)樣的殘留,可以根據(jù)流動(dòng)相的比例組成沖洗一段時(shí)間(如果含緩沖鹽的話,直接用水相代替原先含鹽的水相即可),一般沖洗20個(gè)柱體積。然后在過(guò)渡到封柱比例的溶液即可。GPC色譜柱沖洗的問(wèn)題。我來(lái)談?wù)勎易约旱囊稽c(diǎn)意見(jiàn),主要針對(duì)的反向GPC色譜柱而講的。
1.一般情況都是沖洗GPC色譜柱20倍柱體積,具體可以這樣計(jì)算,根據(jù)柱內(nèi)徑和柱長(zhǎng)算出GPC色譜柱內(nèi)體積。短柱一般時(shí)間就是30分鐘就可以了啊!流速是1.0毫升每分鐘。
2.沖洗GPC色譜柱最好在分析結(jié)束后,用流動(dòng)相沖洗到基線平穩(wěn),然后用10%左右的有機(jī)溶劑沖洗GPC色譜柱,主要是沖洗干凈流動(dòng)相中的緩沖鹽。然后用100有機(jī)溶劑沖洗。最好是梯度變化沖洗。分析物可能為一些能溶解在水中,有些需要用純?nèi)軇┎拍芡耆コ?。如果分析時(shí)間緊迫一定要把鹽分沖洗干凈,一般情況不要用純水沖洗GPC色譜柱,特別是反向柱的填料的鍵合集團(tuán)容易折斷,對(duì)GPC色譜柱造成損傷。
3.GPC色譜柱被使用在某種程度上就是開(kāi)始被污染了,所以GPC色譜柱的壽命和我們使用的情況有很大的關(guān)系。雖然被污染但是對(duì)我們分析目標(biāo)物沒(méi)有造成影響我們也就是認(rèn)為還能用。
4.前面談到的不管用什么溶劑一定要加入一定比例的用機(jī)溶劑,主要是考慮到一些疏水基團(tuán)在有機(jī)溶劑里面容易伸展利于沖洗其包藏的雜質(zhì)等。當(dāng)我們的GPC色譜柱在壓力和柱效下降時(shí),我可以拆開(kāi)泵近端柱頭的螺絲取出篩板,清洗篩板以及觀察里面的填料,如填料污染嚴(yán)重,就要進(jìn)行挖取一部分被污染的填料然后用其他廢棄的柱子相同填料來(lái)填補(bǔ),用新的篩板或清洗好的篩板擰好螺絲。然后沖洗觀察柱壓變化和測(cè)試柱效等。
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